¿Es suficiente limpiar con RNAse Zap para destruir la actividad de RNAse?

De la MSDS de RNAseZap, es una SDS a una concentración desconocida, ¿quizás con algo de NaOH?

Algunos otros enlaces sugieren que también hay algo de NaOH.

El sitio de Ambion afirma que RNAseZap destruye la actividad de RNAse al contacto, pero también indican que se enjuague con agua dos veces después de limpiar RNAseZap en la superficie que se está limpiando.

Entonces, ¿RNAseZap realmente destruye la actividad de la ARNasa, o es simplemente un "buen detergente" para recogerlos y enjuagarlos?

¡Gracias! carmen

Busque su patente. Recuerdo que era una sal de amonio.

Respuestas (2)

Es difícil saber qué hace RNaseZap ya que la lista de ingredientes es un secreto comercial. Sin embargo, espero que sea mucho más que un simple detergente. RNaseA es extremadamente difícil de destruir; además, puede renaturalizarse fácilmente una vez que se elimina el desnaturalizante. Por lo tanto, cantidades muy pequeñas son suficientes para aniquilar los experimentos de ARN. El método histórico de purificación consistía en hervir soluciones hasta que todas las demás proteínas se desnaturalizaran y pudieran separarse fácilmente. Puedo atestiguar personalmente que puede precipitarlo en alcoholes puros y se replegará espontáneamente tan pronto como se rehidrate.

No confiaría en un simple detergente para deshacerse de él; necesitará algo más volátil para ser confiable. Muchas recetas de "RNaseZap caseras" en Internet incluyen peróxido de hidrógeno, que provoca una variedad de modificaciones covalentes en la proteína. También tiene la ventaja de limpiarse a sí mismo (eventualmente convirtiéndose en H 2 O). El detergente es útil porque normalmente no desea que ningún residuo de proteína flote alrededor de sus experimentos, desnaturalizados o no. Si tiene algunos agregados secos de RNaseA, también ayudará a romperlos.

Trabajo con RNaseA en sí, por lo que no puedo responder personalmente por la receta a continuación (ya que no estoy interesado en destruir mi muestra), pero parece sólido. Pero si tiene dinero para gastar, solo obtenga el RNaseZap. Es muy utilizado por los laboratorios de ARN y realmente no quieres arriesgarte a un experimento potencialmente costoso con él. Especialmente dado que constantemente estás eliminando toneladas de RNaseA de tu piel, ser descuidado probablemente te morderá eventualmente.

El RNAseZAP de Ambion no es un detergente, pero contiene químicos que desnaturalizan la ARNasa, el paso de enjuagar con agua es necesario para limpiar los químicos y las proteínas desnaturalizadas que quedan. Es muy recomendable ya que elimina por completo la ARNasa y el experimento se puede realizar de forma segura. No hay necesidad de arriesgar tiempo, dinero y muestras.

Entonces, en resumen, no es un detergente, sino una solución que desnaturaliza las proteínas.

¡Buena suerte!

¡Gracias! ¿Es esta desnaturalización irreversible?
La MSDS informa que contiene solo un tensioactivo de "secreto comercial" en el rango de 1-20%. ¿Por qué dices que no es un detergente?
¿Qué sustancias químicas que desnaturalizan la ARNasa podría contener?