Estoy trabajando con muestras de ARN e intento tener mucho cuidado con la contaminación por ARNasa.
Sin embargo, tengo algunas preguntas sobre el blanqueador. Algunas personas dicen que una solución de lejía es suficiente para destruir la actividad de la ARNasa, pero ¿realmente es así? ¿Cómo lo hace?
No estoy seguro de si limpiar la superficie con una solución de lejía sería suficiente para matar la actividad de la ARNasa, o si es necesario usar productos como RNAseZap o RNAseAway.
Las ARNasas son enzimas y existen varias formas de inactivarlas. Desafortunadamente, las ARNasas son proteínas bastante estables y el autoclave no elimina por completo su actividad. Los métodos comunes para inactivar son métodos inespecíficos que destruirán cualquier enzima, ya sea mediante modificación covalente o degradación.
Los métodos más comunes para la inactivación de la ARNasa son:
Tratamiento con DEPC. Esto modifica covalentemente la histidina y algunos otros aminoácidos, que inactivarán las ARNasas.
Calentamiento a 200-250 °C durante al menos una hora, esto se usa más comúnmente para equipos de metal y vidrio.
Incubación con NaOH 1 M durante una hora a 37 °C, que hidrolizará las proteínas
Usar lejía no es un método que haya usado, pero en principio debería funcionar ya que el hipoclorito reaccionará con las proteínas .
Creo que están preguntando cómo limpiar superficies como mesas de trabajo.
El blanqueador podría funcionar. Pero una mejor solución sería conseguir una caja de papel de aluminio. Los procesos para hacer la lámina son muy duros, por lo que es dudoso que alguna proteína sobreviva al proceso, sin mencionar que no hay proteínas involucradas en la fabricación de aluminio que contaminen el proceso. Solo asegúrese de usar siempre guantes cuando manipule el papel aluminio o lo contaminará.