¿Cómo esterilizar de forma segura un medio de crecimiento que contiene urea?

Estoy usando un medio de crecimiento que contiene urea para experimentos con bacterias (1-2 l/día). Después del experimento, el medio de cultivo debe esterilizarse y desecharse. Hice esto hasta ahora en autoclave, pero nuestro técnico se quejó del olor a amoníaco que se desarrolla (la urea se descompone cuando se calienta, liberando amoníaco).

Estoy bastante seguro de que la cantidad que se libera al aire no es peligrosa (he vaciado el autoclave varias veces), especialmente si no respiras a propósito en la primera bocanada de aire que sale después de abrirlo, pero creo que es útil. para buscar alternativas. Además, no estoy seguro de si el autoclave podría dañarse a largo plazo.

¿Alguien tiene experiencia con esto? ¿Ve alguna forma de esterilizar grandes cantidades de medio de cultivo de forma fiable sin calentar?

Puede usar métodos químicos para esterilizar los medios; he usado limpiadores que desarrollan dióxido de cloro para este propósito. Esto huele mal y siempre olerá algo de dióxido de cloro al vaciar los recipientes.
¿Es la bacteria potencialmente patógena? ¿Qué bacteria es básicamente?
Es Sporosarcina pasteurii , no patógena y no transgénica. Acabo de escribir un correo electrónico a nuestro oficial de seguridad para preguntar si la esterilización es absolutamente necesaria, pero supongo que tendré que hacerlo. Además, podría usar OGM en el futuro, y entonces es imprescindible.
Los bacilos pueden formar esporas; No estoy seguro si este puede. A veces utilizo ácido concentrado (H₂SO₄) para desinfectar cosas, especialmente matraces que llevan mucho tiempo sin lavar (con medios todavía dentro; contienen una variedad de organismos). Puede neutralizar el ácido después del tratamiento. Aunque es un poco peligroso. Los desinfectantes comunes deberían funcionar para usted.

Respuestas (2)

El autoclave es la mejor manera de esterilización. Si su medio de cultivo es grande, ¿cuánto desinfectante químico cree que necesitaría llevar a su concentración de trabajo?

Agregue un poco de ácido a su medio de desecho (para que sea solo débilmente ácido), no como desinfectante, sino para suprimir la formación de amoníaco. La urea seguirá descomponiéndose durante el autoclave, pero el ion amonio (pKa~9) generalmente permanecerá en solución.

Debe consultar con las pautas de su institución, ya que las diferentes instalaciones tienen diferentes regulaciones, pero generalmente es aceptable:

En una campana extractora y en un recipiente ventilado (sin sellar):

1.añadir lejía líquida hasta una concentración final del 20 % (añadir 1 parte de lejía por 3 partes de cultivo)

2.Dejar reposar toda la noche

3. Desechar por el desagüe con abundante agua.