¿Es la PCR una técnica de clonación de ADN?

Según Genomas

PCR es

Una técnica que da como resultado la amplificación exponencial de una región seleccionada de una molécula de ADN [en un tubo de ensayo].

La clonación de ADN es

Inserción de un fragmento de ADN en un vector de clonación y posterior propagación de la molécula de ADN recombinante en un organismo huésped .

Mientras, Biología Molecular de la Célula , Sexta Edición dice en un resumen:

Clonación de ADN (mediante el uso de vectores de clonación o la reacción en cadena de la polimerasa ) en la que una parte de un genoma (a menudo un gen individual) se purifica del resto del genoma mediante copias repetidas para generar miles de millones de moléculas idénticas.

Aquí, la clonación de ADN se ha utilizado para referirse a la replicación de ADN en general.

Pregunta: ¿ Qué punto de vista del autor es correcto, o al menos proporciona las definiciones más aceptadas?

Respuestas (3)

Respuesta corta
Todas sus fuentes son correctas ya que no se excluyen mutuamente. La PCR se utiliza para aislar y amplificar el ADN para producir pequeñas cantidades de producto objetivo puro. La clonación de genes se puede aplicar posteriormente para escalar la producción del fragmento. Por lo tanto, la PCR puede ser parte del proceso de clonación de ADN.

Antecedentes
La clonación en general simplemente significa duplicar. La clonación en biología se refiere a

[Hacer] una copia exacta de un animal o una planta creada en un laboratorio a partir del ADN del animal o la planta

fuente: Diccionario McMillan

La clonación de genes , según tengo entendido, se refiere específicamente al aislamiento de un solo gen e insertarlo en las células para amplificarlo:

La producción de un linaje de células que contienen un tipo de fragmento de ADN de interés derivado de una población de muchos tipos de fragmentos de ADN.

fuente: Universidad del Noroeste

La PCR es una técnica para amplificar una hebra específica de ADN que se puede usar para clonar posteriormente ADN en células huésped (fuente: New England Biolabs ). La clonación se realiza para aumentar la cantidad de ADN. La PCR usa cebadores y se puede usar para aislar y amplificar el ADN hasta la escala en que es fácilmente clonable.

Respuesta corta

El Oxford English Dictionary es bastante claro al respecto. Para el verbo clonar hay dos significados:

Biología Para propagar (un organismo o célula) como un clon.

Biología Molecular Hacer copias de (una secuencia de ADN o un gen).

La última definición abarca claramente la PCR.

Leccion de historia

La mayor parte de la información a continuación está tomada del Oxford English Dictionary.

El término clon tiene una larga historia, primero como sustantivo y más recientemente como verbo. La evolución del significado y el uso de la palabra sugiere que no deberíamos ser demasiado cuidadosos con esto.

Cuando uso una palabra”, dijo Humpty Dumpty, en un tono más bien desdeñoso, “significa exactamente lo que elijo que signifique, ni más ni menos”. “La pregunta es”, dijo Alicia, “si puedes hacer que las palabras signifiquen tantas cosas diferentes”. “La cuestión es”, dijo Humpty Dumpty, “quién será el amo, eso es todo.

La palabra se basa en una palabra griega para ramita y se usó originalmente como sustantivo en la forma clon .

1903 HJ Webber en Science 16 Oct. 502/2 Los clones son grupos de plantas que se propagan mediante el uso de cualquier forma de partes vegetativas.

Pronto ganó la e final .

1905 CL Pollard en Science 21 de julio 88/1 Por lo tanto, sugiero clonar (plural clones) como la forma correcta de la palabra.

Para 1930 se había convertido en un verbo...

1930 Jrnl. Ecol. 18 357 Este es probablemente un récord para el número de 'individuos' obtenidos a la vez mediante la clonación de una planta herbácea

...y, presumiblemente porque las bacterias se consideraban plantas en ese momento, también se usaba en microbiología.

1929 Bibliographia Genetica 5 234 En Bacillus coli communis... también se encontró un biotipo que tenía una motilidad más baja que el resto del clon del que procedía.

A principios de la década de 1960 se extendió a los animales, probablemente como resultado directo de los experimentos de Gurdon con Xenopus.

1963 JBS Haldane en G. Wolstenholme El hombre y su futuro 352 Quizás el primer paso sea la producción de un clon a partir de un único óvulo fecundado, como en Brave New World.

Y finalmente, el significado se amplió para abarcar las moléculas de ADN, por lo tanto, la clonación molecular .

1974 Proceso. Academia Nacional. ciencia USA 71 3459/1 Se ha demostrado que ColE1 sirve como un vehículo molecular eficaz para clonar y amplificar regiones específicas de ADN no relacionado.

(Puntos adicionales si ha leído hasta aquí Y sabe qué es ColE1).

Me parece que esta cita final muestra que la confusión sobre lo que los biólogos moleculares entienden por clonación surgió muy pronto. Si clonar significa “hacer copias de”, entonces ¿por qué la palabra amplificación está ahí? De entrada creo que la clonación molecular conllevaba el sentido de purificar (cortar y ligar). O eso pensé cuando lo hice por primera vez en 1980.

Actualizar

A pesar de mi confianza en las definiciones de diccionario anteriores, y motivado por el descubrimiento de Tyto alba de una definición contradictoria en una publicación diferente de OUP (ver comentario), esto es lo que realmente pienso:

Cualquiera que haya obtenido alguna vez una colonia bacteriana que contenga un plásmido con el fragmento insertado que querían anunció "¡He clonado el gen!" y significaba que habían hecho un plásmido recombinante Y lo habían introducido en las células. Por otro lado, si comenzaron con una amplificación por PCR y luego corrieron un gel para verificar antes de ligar y vieron un fragmento del tamaño esperado, no dijeron "¡He clonado el gen!" Y, por último, el clonador exitoso, al eliminar su colonia de transformantes, rara vez se habrá referido a este paso como clonación.

¡¿Encontré en 'A dictionary of genetics' (publicado nuevamente por Oxford) decir que significa crear copias genéticamente idénticas de células recombinantes, excluyendo la parte in vitro (pg-182) ?! ¿Debería OED considerarse más preciso cuando estamos mirando palabras como esta?

Puedes decirlo. La amplificación de ADN es un término más generalizado para lo que está indicando. Clonación de genes con ayuda de bacterias ; conocido popularmente como solo clonación de genes o clonación molecular ; se utiliza principalmente para la amplificación de genes o ADN in vivo ; y también el método de PCR (el tipo más básico) también es para la amplificación de ADN , pero en condiciones in vitro , libres de células .

Pero en la práctica puede crear cierta confusión; ya que el término "clonación de genes"/"clonación molecular" se refiere popularmente a la que se realiza en bacterias vivas. (aunque el propósito o aplicación es muy similar).

Referencia: Wikipedia