RNAi se hizo famoso después del experimento Fire and Mello en C.elegans; sin embargo, se había observado antes. En los años 80, Jorgensen intentaba aumentar la pigmentación de las flores de Petunia introduciendo copias extra del gen de la chalcona sintetasa, que codifica una enzima implicada en la síntesis de antocianinas.
Sin embargo, este experimento condujo al silenciamiento génico postranscripcional (PTGS) por un mecanismo que no se entendía en ese momento, llamado interferencia de ARN.
Aquí puede encontrar más información sobre el experimento (incluido el vector utilizado para introducir el gen).
Sé cómo funciona el ARNi por la vía clásica; sin embargo, no entendía cómo una copia extra del gen podía generar el silenciamiento del gen. La introducción de secuencias de ADN se ha utilizado para derribar genes objetivo, sin embargo, generalmente estas secuencias se planifican para que formen una horquilla que Dicer reconoce; probablemente, el investigador no utilizó tal secuencia. Además, los genes exógenos se usan ampliamente sin que resulte en un ARNi no planificado.
¿Alguien sabe más información sobre lo que posiblemente sucedió en el experimento para producir ARNi?
La respuesta está en las diapositivas a las que proporcionó un enlace. El hecho clave es que Craig & Andy realizaron controles cuidadosos para demostrar que era la presencia de dsRNA tanto en el control con sentido como en la muestra experimental antisentido la responsable de la desactivación mediada por RNAi. En realidad, Ken Kemphues mostró esto anteriormente en un artículo de Nature (el control también eliminó la expresión génica), pero no investigó el mecanismo.
Por lo tanto, infiero que la construcción de expresión génica transgénica introducida en las petunias también debe dar lugar a dsRNA. Estoy menos familiarizado con las consecuencias de introducir ADN extraño en una célula vegetal (p. ej., ¿se integra una sola copia, múltiples copias?, ¿se mantiene extracromosómicamente?)