Por ejemplo, en este protocolo para la preparación de células competentes de E. coli, dice:
Coloque 10 uL de células de E. coli BL21(DE3) en una placa de agar LB; incubar durante la noche (12 horas).
Prepare 500 ml de medio SOB para que pueda precalentarse en la incubadora a 37 grados centígrados el día anterior.
Elija una sola colonia seleccionada e inocule en 5 mL de medio SOB y crezca durante 16 horas a 37 grados Celsius y 250 rpm en un agitador.
Inocule 500 mL de medio SOB precalentado con 5 mL del cultivo fresco durante la noche.
y luego en el protocolo para la sobreexpresión de proteínas después de la transformación de estas células, básicamente sigo pasos similares a los anteriores pero esta vez, sin precalentar el medio líquido de inoculación a gran escala. ¿Porqué es eso?
Es porque E.coli BL21(DE3) son células competentes. La competencia es la clave aquí, ya que las células se trataron químicamente para que la transfección se pueda realizar por choque térmico con alta eficiencia.
Esto significa que estas bacterias son bastante frágiles debido al tratamiento químico y, por lo tanto, son muy sensibles a los choques mecánicos y térmicos.
Precalentar el medio simplemente evita dañar las células y maximiza la tasa de crecimiento.
MattDMo
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