Optimización de péptidos señal

Estamos estudiando la modificación del péptido señal de un receptor en una línea celular humana inmortalizada común. La línea celular ya expresa una cantidad inusualmente alta de la proteína, pero gran parte de ella no se expresa en la superficie.

Cuando comparamos la secuencia del péptido señal en la línea celular (en este caso específico el primer 19AA), encontramos 2 mutaciones frente a la secuencia de tipo salvaje (WT). Una idea obvia, que haremos, es restaurar el péptido a la versión WT.

Pero tengo curiosidad acerca de las opciones que aumentan el tráfico a la membrana plasmática sobre WT. Cuando he buscado grupos que realmente han hecho esto, normalmente ha sido con pantallas grandes contra cada posible mutación en el péptido señal.

¿Existen enfoques específicos para elegir una pequeña cantidad de péptidos señal para aumentar la expresión en la superficie?

Estoy jugando con el intercambio de algunos péptidos virales que no están relacionados en absoluto para ver si podemos aumentar la expresión con un receptor que todavía es (semi) funcional.

¿Hay alguna evidencia para la idea de que la secuencia señal es la causa de la falta de expresión en la superficie? ¿Sabe dónde se encuentra realmente el resto de la proteína (no en la superficie)?
Por la tinción, parece ser mayormente difuso a través del citoplasma, no realmente en los puntos como hubiera pensado por el mal plegado. También sabemos que lo que se expresa superficialmente es funcional.
Además, estoy interesado en el caso general si hay una, proteínas transmembrana tipo I si se necesita un tipo. Diré que está interesado en cualquier modificación en particular, incluso si es un péptido señal que no se encuentra en el huésped (por ejemplo, viral). Estoy tratando de que mis muchachos de transferencia de tecnología me aclaren la pregunta sobre la proteína específica.
No tengo una respuesta a la pregunta, pero estoy intrigado por el problema. ¿Parece que las mutaciones podrían afectar la función de SP? Mientras tanto , aquí hay un documento sobre los principios generales de diseño que quizás no haya visto. Es viejo, pero es de G von Heijne.
@AlanBoyd Vale la pena leer cualquier von Heijne independientemente de la aplicación. Esa fue la fuente principal que me llevó a hacer la pregunta.
Además, la mutación es una mutación de serina, así que creo que probablemente cambie las cosas.

Respuestas (1)

Podría aumentar la transcripción del gen del receptor que le interesa. Más receptores producidos = más receptores expresados ​​en la superficie de la célula.

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