¿Es posible amplificar cada fragmento de ADN mediante PCR?

¿Hay alguna manera de realizar una amplificación por PCR no específica con el fin de amplificar cada fragmento de ADN presente?

¿Cuál es la fuente del ADN? Si la variación menor no es un problema, entonces puede triturar más volumen de tejido/cultivo para extraer más ADN. Todas las células de su cuerpo y la mayoría de las células en cultivos tienen (casi) el mismo ADN
en realidad, así es como funciona RNAseq. Se produce una gran cantidad de ADN a partir del ARN, luego se agregan adaptadores a los fragmentos de ADN (conozca las secuencias cortas) en sus extremos, y luego esos fragmentos de ADN se amplifican con PCR.
¿ Estás preguntando sobre la amplificación del genoma completo ?
Ah, gracias, eso era lo que estaba buscando.

Respuestas (2)

En breve; Teóricamente sí.

En la práctica no.

La PCR no específica requiere cebadores aleatorios para hibridarse con una secuencia objetivo para iniciar la replicación durante la PCR. En teoría, esto debería hibridarse con cada combinación de bases y, por lo tanto, permitir la amplificación de todo el ADN (o al menos en forma fragmentada).

Prácticamente, todas las combinaciones de cebadores tendrán diferentes temperaturas de hibridación del cebador debido a la composición diferencial de la base, lo que hace que la amplificación de la fragmentación sea inconsistente y, en otros, completamente imposible.

En breve; Teóricamente sí.

En la práctica no.

Estoy de acuerdo con esta opinión.

Pero, hay algunos métodos para hacerlo. Ligar ambos extremos con etiquetas específicas para amplificar fragmentos de ADN con el conjunto de cebadores específicos de etiquetas. Si tiene fragmentos de ADN de diferente longitud en la muestra original, los productos de PCR podrían estar sesgados.