En las imágenes de microscopía de fluorescencia, ¿qué significa el término "punto"?

Estoy leyendo artículos donde se analizaron imágenes de microscopía de fluorescencia confocal. En muchos de los artículos, veo que se usa el término "punto" cuando los investigadores analizan la colocalización entre 2 proteínas. Por ejemplo, en el documento vinculado:

Además, muchos puntos puncta positivos para C1q en la IPL se asociaron con puntos sinápticos identificados mediante inmunotinción doble con marcadores sinápticos como PSD-95.

No estoy seguro de lo que significa el término "punto" en el contexto de la inmunocitoquímica. He leído que la definición general de puncta es un punto pequeño y distinto. Sin embargo, me preguntaba si puncta es sinónimo de grupos de una proteína (por ejemplo, en el ejemplo anterior, ¿los puntos sinápticos se refieren a grupos de la proteína PSD-95?)

Cualquier idea es apreciada.

Respuestas (1)

He leído que la definición general de puncta es un punto pequeño y distinto.

Eso es correcto. Según tengo entendido, puncta son puntos.

Sin embargo, me preguntaba si puncta es un sinónimo de grupos de una proteína.

En el contexto de la microscopía de fluorescencia, un punctum ( plural puncta) no se refiere específicamente a la agregación de proteínas. Cualquier punto pequeño y distinto en el campo de visión puede llamarse puncta. Me gusta pensar en puncta en contraste con focos , que generalmente entiendo como regiones de interés, aunque, en la práctica, los dos términos a menudo se usan indistintamente. Estos son algunos ejemplos de la literatura:

La fosforilación de H2AX en Ser 139 , que da como resultado la formación de γH2AX puncta en los núcleos, es un evento temprano en la respuesta celular al daño del ADN.

Chiu YH, Hsu SH, Hsu HW, Huang KC, Liu W, Wu CY, Huang WP, Chen JY, Chen BH, Chiu CC. Las células humanas de cáncer de pulmón de células no pequeñas pueden sensibilizarse a la camptotecina mediante la modulación de la autofagia. Int J Oncol . 2018 noviembre;53(5):1967-1979.

Es bien sabido que la histona H2AX se fosforila en Serine139 a γH2AX inmediatamente después de la irradiación e involucra una gran región de cromatina de hasta ~ 2 Mbp, formando así distintos focos de tamaño μm en los sitios de DSB.

Memmel S, Sisario D, Zimmermann H, Sauer M, Sukhorukov VL, Djuzenova CS, Flentje M. FocAn: análisis 3D automatizado de focos de reparación de ADN en pilas de imágenes adquiridas por microscopía de fluorescencia confocal. BMC Bioinformática . 2020 28 de enero; 21 (1): 27.

Mi impresión es que "punto" se usa en microscopía de fluorescencia (y quizás en autorradiografía) cuando los puntos son indistinguibles de una sola fuente puntual, pero debido a que es plural, están hablando de un montón de puntos desde la perspectiva de los puntos. Cuando escriben "focos" están hablando de una región desde donde se emite la luz, sin especificar si han observado puntos individuales o no. Es posible que obtenga diferentes descripciones de la misma organización solo porque las personas piensan de manera diferente o debido a diferentes técnicas de imagen. O podría estar leyendo demasiado en él.
Estoy de acuerdo con eso. Puncta son puntos. Los focos pueden contener puntos, o los focos pueden ser simplemente una región de fluorescencia difusa pero perceptible.