Pregunta sobre 2 construcciones de la planta de tabaco.

Se llevaron a cabo seis experimentos de transformación independientes de explantes de hojas de tabaco utilizando dos construcciones diferentes: (1) construcción I que contiene solo un gen de resistencia a la higromicina ( H Y GRAMO R ) como marcador de selección y (2) construir II con el ( H Y GRAMO R ) gen como marcador de selección y un gen pasajero que codifica una enzima desfosforilasa ( D mi PAG ) que inhibe la fosforilación en las células en las que se expresa. El marcador, así como los genes pasajeros, se colocaron bajo el control transcripcional de un promotor constitutivo. ( C a METRO V 35 S ) , que se expresa en todas las células/tejidos. Los resultados obtenidos se tabulan a continuación.

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Explique cómo la H Y GRAMO R El gen usado en la construcción II perdió su funcionalidad probablemente debido a mutaciones en el gen o en el promotor.

Mi enfoque: existe la probabilidad de que Expresión de la D mi PAG El gen es letal para las células transformadas.

Respuestas (1)

Tener un producto tóxico para la célula en un vector de expresión es un problema común cuando se sobreexpresan proteínas.

La otra posibilidad es que el propio marcador de selección sea el problema. Aquí puede haber mutaciones tanto en el promotor del gen como en el propio gen, lo que da como resultado una proteína que no es capaz de proteger a las células de la selección. Ambas posibilidades (sin expresión y proteína mutada) llevan a la muerte de las células transfectadas, ya que no hay protección de las mismas por la proteína de resistencia.