Estoy tratando de disociar un tumor, y la mayoría de los protocolos como NCI/NIH recomiendan un stock de digestión de enzima triple 10X que consta de: colagenasa tipo IV, DNasa I tipo IV y hialuronidasa tipo V en HBSS. Esto se remonta a los años 90, y la receta varía según los papeles (dispase, papaína, proteasa neutra, elastasas, etc.). Sin embargo, la supuesta receta oficial que se me ha encomendado usar se compone de lo anterior, principalmente de Sigma-Aldrich (C5138, D5025, H6254)
Sin embargo, realmente no puedo encontrar nada que diga cuáles son las diferencias reales entre estos tipos de enzimas. O por qué, por ejemplo, la ADNasa tipo IV funciona mejor que la tipo II, y así sucesivamente. ¿Es tal vez que la receta se quedó pegada?
Han pasado años desde que miré un catálogo de Sigma (antes de que se convirtiera en Sigma-Aldrich) pero, según recuerdo, estas designaciones son propiedad arbitraria que utiliza Sigma para distinguir diferentes fuentes; el punto clave es que Sigma generalmente no fabricaba todos estos ellos mismos, pero obtenidos de terceros.
El otro punto a tener en cuenta es que estas preparaciones de enzimas generalmente eran/son impuras, pero en diferentes grados, por lo que las designaciones de tipo le permitieron volver a pedir una preparación particular que funcionó, y también especificar el grado real que usó cuando lo publicó. que otras personas puedan repetir tu trabajo. Sin duda, los grados más caros también funcionarían en el tipo de aplicación rudimentaria que describe, pero sería una pérdida de dinero.
Pensé que los catálogos solían darte alguna información (organismo/tejido al menos), pero, como dije, ha pasado mucho tiempo (aunque ojo con tu “camino de vuelta a los 90”, jovencito).
MattDMo
CKM
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David