Para mi proyecto, estoy cultivando levadura de panadería y probióticos en dos cultivos líquidos antes de mezclarlos y colocarlos en placas. Estoy tratando de medir el impacto de los probióticos en la levadura. ¿Cómo podría medir la cantidad de hongos en la placa, ya sea por conteo de células o por área de superficie?
Puede contar las colonias individuales en la placa, siendo este número el número de "Unidades formadoras de colonias" (CFU), ya que, en teoría, solo se necesita una sola célula para generar una colonia.
Sin embargo, para hacer esto, deberá hacer una dilución en serie de sus cultivos líquidos antes de sembrar, por lo que tendría una placa de 10 dilución, luego 10 , 10 , y así sucesivamente, generalmente se realiza una dilución de diez veces.
Con suerte, esto producirá al menos una placa con un número contable de colonias, es decir, ni muchas ni muy pocas, generalmente 30-300.
ufc/ml = (nº de colonias x factor de dilución) / volumen de cultivo en placa
Esto generalmente produce un número muy grande, por lo que es común tomar el registro de este número e informarlo como resultado.
Y luego podrá comparar sus resultados entre los probióticos. ¡Es una muy buena idea hacer réplicas de cada dilución!
Como explica el usuario GrumpyMammoth, puede hacer diluciones en serie hasta que las colonias sean lo suficientemente pocas como para contarlas y luego calcular las CFU usando el factor de dilución.
Si no desea contar las colonias usted mismo, puede utilizar la función "Analizar partículas" de ImageJ. Esto le dará el número de colonias.
La función "Analizar partículas" de ImageJ también le dará el tamaño de la colonia (área de superficie) en píxeles. Esto se puede convertir a milímetros en ImageJ abriendo la pestaña Imagen> Propiedades y cambiando el parámetro de ancho de píxel.