¿Cómo funciona la recombinación mediada por electroporación?

La electroporación es una forma bastante común de introducir ácidos nucleicos exógenos en las células. Su nombre describe esencialmente el proceso: se aplica un potencial de voltaje eléctrico a través de una membrana biológica, lo que eventualmente conduce a la producción de poros hidrofílicos conductores. La imagen a continuación es de la página de Wikipedia vinculada anteriormente, que muestra poros hidrofóbicos no conductores (superiores) e hidrofílicos conductores (inferiores). Dependiendo del voltaje, la composición de la membrana y otros factores, estos poros eventualmente pueden "curarse" y cerrarse nuevamente, o unirse y provocar la ruptura de la célula.

La electroporación se usa en el laboratorio como un método para transfectar o transportar ácidos nucleicos (generalmente ADN) a las células, para que expresen genes que de otro modo no expresarían, o para alterar la maquinaria genética. El ADN transfectado puede permanecer en su propia estructura (como un plásmido ) o incorporarse (recombinarse) en el genoma del huésped, de manera similar a lo que sucede durante una infección por retrovirus . Que esto suceda o no depende de la estructura y la secuencia del constructo que se introduce, no del método de introducción.

Entonces, en referencia a su pregunta, la electroporación no hace nada que permita directamente que ocurra más recombinación; todo lo que es es un método de transporte. Sin embargo, la electroporación puede permitir que ciertas construcciones se introduzcan en el huésped de manera más eficiente, o que se introduzca una mayor cantidad de ellas, lo que conduce a una mayor eficiencia de transformación . Algunas células, especialmente las células primarias como las neuronas, por ejemplo, solo pueden transfectarse con algún tipo de eficiencia con electroporación. Sin embargo, la electroporación también puede tener sus inconvenientes, ya que puede ser bastante estresante para las células y, si los voltajes y el tiempo no se ajustan correctamente, puede conducir a altos niveles de muerte celular.