¿Por qué podemos usar anticuerpos producidos en ratones en tejidos de ratones?

He visto a biólogos usar anticuerpos primarios cultivados en ratones en tejido de ratones, y me han dicho que si la sangre se perfunde bien, entonces no hay problema con este método. ¿Cómo es posible que el anticuerpo secundario (anti-ratón) no se pegue en todas partes a todos los antígenos de ratón en el tejido?

Aclaración: entiendo que el anticuerpo secundario es muy específico para todos los anticuerpos primarios de "clase" de ratón. Entonces, ¿puedo preguntar por qué el uso de un anticuerpo de ratón secundario no reconoce los anticuerpos de fondo en el tejido, los que el ratón produjo por sí mismo de forma natural antes de que agregara alguno de mis anticuerpos primarios? ¿Los niveles de anticuerpos primarios existentes ya están presentes en el ratón mucho más bajos que los niveles del anticuerpo primario que estoy agregando?

Respuestas (2)

La razón por la que el anticuerpo secundario solo reconoce el anticuerpo primario es relativamente simple: se dirige contra la parte Fc del anticuerpo primario. Como esta parte es específica de especie (pero constante entre todos los anticuerpos de una especie, de ahí el nombre constante), un anticuerpo secundario anti-ratón se dirige contra todos los anticuerpos de ratón.

El principio general se puede ver en la figura (aunque esto es del inmunomarcaje, el principio sigue siendo el mismo, Imagen de la Wikipedia ):

ingrese la descripción de la imagen aquí

El secundario anti-ratón reconoce los anticuerpos que están presentes en el tejido. Estos generalmente están presentes en niveles bajos (a menos que trabaje con tejidos inmunes como el bazo) y solo causan un fondo relativamente bajo. Si causa un problema, puede tratar su muestra antes de agregar la primaria con un bloque Fc que bloquea los anticuerpos presentes en el tejido para que el anticuerpo secundario ya no los reconozca más adelante.

Creo que esencialmente dijimos lo mismo.

Los anticuerpos son muy específicos en lo que reconocen (esto se llama epítopo, que es la pequeña parte del antígeno que es reconocida por un anticuerpo específico), y los anticuerpos secundarios están hechos para unirse a una parte específica del anticuerpo primario; puede lograr esto. con AB monoclonales. Los antígenos pueden ser reconocidos por muchos anticuerpos (porque pueden tener muchos epítopos para diferentes anticuerpos), pero generalmente un solo anticuerpo reconoce solo unos pocos o más probablemente un solo antígeno al máximo (ya que el epítopo específico al que se une solo está presente en unos pocos). o un solo antígeno(s)).

La página wiki de anticuerpos tiene muchos detalles sobre cómo funcionan los AB.

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