¿Es posible almacenar una digestión de células con tampón de lisis varios días a -20 grados y luego proceder con la purificación de fenol cloroformo isoamilo?
Debería estar bien, pero si yo fuera usted, dedicaría unos minutos más y continuaría hasta la precipitación de etanol (15 minutos de trabajo en el peor de los casos). Aquí está el protocolo: https://www.thermofisher.com/pl/en/home/references/protocols/nucleic-acid-purification-and-analysis/dna-extraction-protocols/phenol-chloroform-extraction.html
Puedes almacenarlo a -20 grados por varios días (extender la incubación durante toda la noche, ese es el segundo paso de la precipitación con etanol) y tendrás la certeza de que se mantendrá bien. De hecho, la congelación en la mayoría de los tampones, ya sean tampones de lisis o tampones de extracción, no debería dañar significativamente ningún ácido nucleico. Desde mi experiencia personal: he congelado material vegetal en tampón de extracción para el aislamiento de ARN (método TRI-zol) en -80 durante unos días y al final obtuve concentraciones muy altas en la mayoría de las muestras. Me dijeron que congelar en -20 afectaría la calidad, pero el ARN generalmente es menos estable que el ADN.
Si tenía poco o nada de material, es mejor que haga el procedimiento de precipitación y luego lo congele. Si se trata de cantidades minúsculas y/o trabaja con algo sensible como evidencia forense, seguir con el procedimiento será la solución más razonable.
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