He leído artículos que contienen afirmaciones como "el control de la expresión génica es fundamental en los procesos biológicos".
¿Cómo se cuantifica exactamente la "expresión génica"? ¿No es la expresión génica un término general que describe todo el mecanismo por el cual el ADN se sintetiza en el fenotipo de un organismo?
El producto principal de los genes que codifican proteínas son los ARNm. Cuando hablamos de medir la expresión génica, queremos analizar los niveles en estado estacionario de un ARNm específico dentro de una célula. Esto generalmente se logra comenzando con una gran cantidad de células y recolectando todos los ARNm de todas las células. Una forma de medir el nivel de expresión del ARNm de un solo gen es realizar un Northern Blot. Otros métodos sensibles incluyen: un ensayo de protección de nucleasa S1, un ensayo de protección de ARNasa y un ensayo de extensión de cebador.
Los microarreglos también se han utilizado ampliamente para medir los niveles de expresión de miles de genes al mismo tiempo en un solo experimento.
Con la llegada de la metodología RNA-Seq, es posible contar el número de transcritos en un experimento (si tiene un genoma de referencia secuenciado)
Según datos de próxima generación:
Nunca trabajé directamente con ARNm, pero lo que obtuve del bioinformático fue algo así: extraes tu ARNm, lo secuencias, lo filtras según la calidad y la longitud, lo ensamblas y lo que tienes es algo así como "transcripciones". Los que está contando: xy de transcript1 & yx de transcript2. Está buscando más isoformas y, al final, está corrigiendo estos recuentos de acuerdo con las lecturas iniciales que calculó. Al comparar las transcripciones con un control, puede medir si está regulado hacia arriba o hacia abajo (estableciendo las lecturas del control como "cero", como 1234 lecturas de una transcripción son normales... en la muestra 2 tiene 5000 lecturas de esta transcripción... . el gen parece estar regulado al alza). Por lo que sé, es aproximadamente la forma en que se realizan las aproximaciones/cuantificaciones de la expresión génica.
El verde
ShanZhengYang
perry
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