Soy consciente de que el ADN circular puede estar tanto relajado como súper enrollado. Sin embargo, cuando ejecuto un gel de agarosa del plásmido circular junto con el plásmido digerido individualmente con BamHI y HindIII, veo 1 banda para el plásmido linealizado (carriles 2-5) (como se esperaba) pero 5 bandas para el plásmido circular (carriles 6 y 7 ).
¿Cuáles son estas diversas conformaciones?
No lo tengo en mis manos, pero no me sorprendería si el ADN superenrollado migra a diferentes distancias según alguna conformación topológica interna (es decir, más o menos enrollado Y/O más o menos mellado). Del mismo modo, esta imagen destaca >8 conformaciones. Lo que se ejecuta en el gel es ADN de fago circularizado con algún grado de anudado debido a la circularización (el ADN de fago es por lo demás lineal).
Figura de: Arsuaga et al. 2005, PNAS 102 (26) 9165-9169 ( gratis en PubMed Central )
Otra posibilidad teórica es que se cultivaron dos o más plásmidos de diferentes tamaños en el mismo maxiprep debido a alguna contaminación. Pero en este caso, el problema lo detectarás también en la digestión, por lo que no parece ser tu caso.
Gianpaolo tiene razón en que estás viendo las diferentes conformaciones del ADN circular.
El crecimiento de plásmidos en bacterias produce 3 formas principales: relajado, enrollado y súper enrollado.
Concluiría de tu imagen lo siguiente:
Si estas son muestras importantes, consideraría purificarlas usando métodos más limpios, por ejemplo usando una columna.
Creo que todas estas respuestas han pasado por alto la explicación más probable de las múltiples bandas en la muestra sin cortes. Estoy de acuerdo en que es probable que vea círculos superenrollados, lineales y relajados (abiertos) en ese orden subiendo por el gel. Pero luego, todas esas formas superiores son lo mismo que se repite para los dímeros, trímeros, etc. formados por recombinación entre moléculas de plásmidos. Entonces, por ejemplo, creo que la banda de 10 kb en los carriles sin cortar es un dímero superenrollado. Tengo un vago recuerdo de que se ven más de este tipo de cosas si el ADN se prepara a partir de una cepa recA de E. coli .
actualización Aquí hay alguien que creo que estaría de acuerdo.