¿Cómo afectará el cambio de la concentración de un tampón Tris a la actividad de la enzima amilasa?

Por ejemplo, si aumenta la cantidad de Tris pero el pH aún no cambia, ¿la actividad de la enzima continuará normalmente? Si cambia el pH, ¿cambiará la estructura de la enzima y por qué?

Soy un novato en biología, pero buscar en Google "amilasa ph" resultó en un pH recomendado de 7.0 para "alfa-amilasa pancreática humana". Entonces, ¿no dependería del pH del Tris, que olvidé, ya que hay muchos tipos diferentes de preparaciones de tampones Tris? Buscar en Google "Tris" resultó en una página de wikipedia con un pH de 8.0. Entonces, dada esa información, ¿no tendría menos funcionalidad?
¿Aumentar la cantidad de Tris pero no cambiar el pH haría algo significativo?
Para ser honesto, no lo sabría. Pero aumentar la cantidad de Tris causaría un cambio en el pH, ¿no es así? ¿A menos que quieras equilibrarlo con algo básico o ácido? Y entonces, en ese caso, todavía no lo sabría. Siempre pensé que TRIS solo se usaba para obtener el pH óptimo para las enzimas y similares, y que el pH era la razón por la que se usaba.
Suponiendo que el Tris es químicamente inerte a la reacción, una mayor cantidad de Tris aumentará la capacidad de amortiguación (es decir, el pH cambia menos).

Respuestas (2)

Me doy cuenta de que tengo 4 años de retraso, pero quería dar una respuesta a esto. Parece que el tris a menudo tiene efectos inhibitorios sobre la actividad de la amilasa. Agregar más Tris conducirá a una inhibición competitiva con el sustrato y sesgará los resultados.

La unión de Tris a la alfa-amilasa de Bacillus licheniformis puede afectar su actividad de hidrólisis de almidón https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18289113

Después de 4 años de trabajar en enzimología, tengo que decir que tris es realmente complicado, en primer lugar, cuando usa más tris para mantener el pH al mismo que antes, tendrá que volver a ajustar el pH ya que tris es aproximadamente 9, pero la mayoría de las enzimas funcionan. 6 a 7.5 (para la alfa amilasa es 5.8) si no lo hace, entonces su enzima no funcionará correctamente, necesita un grado de pH muy bajo o alto para destruir la estructura 3D de la enzima, por lo que simplemente podemos decir que perderá su funcionalidad, si usted ajustar el pH, la alta concentración puede causar algún problema, como que la amilasa que rodea al sustrato no permita que se conecte a la enzima, en algunos casos, el ácido que usa para ajustar el pH tiene efectos tóxicos en la enzima, el cloro en este caso, pero estoy bastante seguro de que la mejor manera es la optimización para entender la reacción. Atentamente .

¿Cómo afectará el cambio de la concentración de un tampón Tris a la actividad de la enzima amilasa?
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