Sustituto de agar blando

Tengo placas de Petri con una capa base de agar listas para el cultivo de E. coli . Sin embargo, no tengo agar blando para diluir la E. coli antes de verterla en la placa.

¿Alguna sugerencia sobre qué sustancia puedo usar para sustituir el agar blando o cómo podría hacerlo? Tengo lo siguiente a mi disposición del laboratorio de la escuela:

  • Agar base triptona
  • caldo nutritivo
  • Agar Mac Conkey

El medio de agar blando original tenía la siguiente composición:

  • 10 g de triptona Bacto™
  • 9 g de agar Bacto™
  • 5 g KCl
  • 1000 ml de agua
¿Quiere recoger las células en un medio que contenga agar y luego colocarlas en placas?
@Chris ¡Sí! Originalmente estaba usando una solución de agar suave compuesta por 10 g de triptona Bacto™, 9 g de agar Bacto™, 5 g de KCl, 1000 ml de agua.
¿Y supongo que sus placas estándar están hechas con sus medios + agar?
@Chris Correcto, la E. coli en el medio se vierte sobre el agar base para que las placas estándar tengan el medio y el agar.
Ah, preparo las placas con medio + agar.

Respuestas (1)

La buena noticia es que no necesita agar en su medio de cultivo, ya que las bacterias crecen en la superficie de todos modos y la placa puede absorber algo de humedad adicional de su medio de cultivo.

Yo lo que suelo hacer es secar un rato los platos (y también dejar que se calienten, ya que se guardan en la nevera) con el plato boca abajo y un poco abierto. La contaminación no suele ser un problema aquí.

Luego diluyo las células en un volumen apropiado de medio, luego coloco de 50 a 100 µl en el agar y lo extiendo con una espátula Drygalski. Ponga la placa en la incubadora y todo está bien.