RNAi en plantas resistentes a nematodos

Antecedentes: Ciertas plantas han sido manipuladas genéticamente para tener un gen sentido-antisentido de un nematodo parásito. El dsRNA producido por la planta luego inactiva el mRNA producido en el nematodo, quien luego no puede sintetizar la proteína correspondiente y muere como resultado.

Pregunta: ¿Cómo se transfiere el dsRNA de la planta a la célula del nematodo? ¿Por transformación?

Aparentemente se transfiere por simple alimentación. C.elegans que se alimenta de E.coli que produce dsRNA puede producir el siRNA. C.elegans parece tener muchos transportadores de ARN como SID1 .
Sí, in vitro puede simplemente remojar los gusanos en una solución que contiene el dsRNA (es decir, en un plato de microtitulación a gran escala para la detección de HTP); esto no es lo mismo que la ingestión porque los gusanos no comerán si no hay pequeñas partículas en el líquido. Para las bacterias, la E. coli expresa la horquilla de ARN en respuesta a un inductor (IPTG) y luego, después de la ingestión, los contenidos de las células se liberan después de que las células pasan por el molinillo faríngeo, y el ARN es absorbido por las células intestinales, y luego transferidos a otras células por los transportadores.
@wysiwyg gracias. Por favor, vea mis comentarios sobre la respuesta de Ilan.

Respuestas (1)

La pregunta es un poco confusa: ¿está en cuestión la introducción in vitro o in vivo?

En vivo:

Como el nematodo se alimenta de la planta durante su fase parásita, en consecuencia asegura la introducción de moléculas de dsRNA y/o siRNA en el sistema digestivo del nematodo.

introducción in vitro etc ->

El estado de la investigación transgénica basada en ARNi en nematología vegetal

¿Por qué se alimenta de él? Incluso si lo hace, ¿las ARNasas en su sistema digestivo no descompondrán el ARN?
@biogirl Se alimentan de las plantas para la nutrición. Las ARNasas deberían descomponer el ARN, pero no pude encontrar mucha información sobre las exoribonucleasas en el sistema digestivo de los nematodos. Aparentemente, los transportadores de ARN son mucho más activos. Tal vez una adaptación evolutiva.
@biogirl es parte de una evolución parasitaria. El mecanismo de introducción del dsRNA incluye interacciones enzimáticas: el dsRNA se introduce en el sistema digestivo del nematodo al alimentarse de E.coli que expresa dsRNA. El dsRNA se propaga a la vecindad (las acciones de las proteínas SID-2 y SID-1), seguido de la escisión del dsRNA por la RNaseIII, Dicer, en el citoplasma. La unión de los siRNA al complejo de silenciamiento inducido por ARN (RISC) separa las cadenas de siRNA e incorpora los siRNA en el RISC activo. Estos siRNA se dirigen a la molécula de mRNA y el RISC los escinde y se silencia un gen.
@wysiwyg ¡Gracias! ¿Cómo son los transportadores de ARN activos evolutivamente ventajosos?
@biogirl Sobre lo que no puedo comentar. Podría haber sido ventajoso por alguna razón. Hay mucho que especular aquí
RNAi en plantas resistentes a nematodos
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