¿Por qué es importante el PEG para una transformación eficaz de la levadura?

Una forma de hacer una transformación de levadura es usando acetato de litio, un ADN portador monocatenario y PEG (1) . Me preguntaba por qué el polietilenglicol es importante para la transformación eficiente. ¿Cómo afecta la captación del ADN extraño? Yamakawa et al (2) demostraron que el PEG es esencial para la recuperación de las células, pero no pude acceder a ese artículo para leer más al respecto.

1. R. Daniel Gietz y Robert H. Schiest (2007). Transformación de levadura de alta eficiencia utilizando el método de ADN/PEG portador de LiAc/SS

2. Yamakawa, M., Hishinuma, F. y Gunge, N. (1985). Transformación de células intactas de Saccharomyces cerevisiae por polietilenglicol. agricola Biol. química 43, 869-871.

PEG provoca la fusión de protoplastos (en general, bicapas lipídicas)
Encontré este artículo que podría responder a tu pregunta: Shigeyuki Kawai1, Tuan Anh Phan1, Emi Kono1, Kazuo Harada2, Chihiro Okai2, Eiichiro Fukusaki2 y Kousaku Murata1 (2009). Respuesta transcripcional y metabólica en células de levadura Saccharomyces cerevisiae durante la transformación dependiente de polietilenglicol. Journal of Basic Microbiology 2009, 49, 73 – 81 Creo que este es el enlace correcto: onlinelibrary.wiley.com/store/10.1002/jobm.200800123/asset/…
Es más un comentario, pero no puedo agregar uno debido a mis puntos de reputación. Además de lo que otros ya han agregado, también me dijeron que PEG ayuda a estabilizar las células de levadura, lo que aumenta su recuperación. No puedo compartir el artículo de Nature Protocol de Gietz et al, pero este es un capítulo de libro de los mismos autores sobre el mismo tema: researchgate.net/profile/R_Gietz/publication/…

Respuestas (2)

http://www.protocol-online.org/biology-forums/posts/26634.html

Encontré este enlace: dice 'realmente no lo sabemos'. Dice que PEG se une al ADN, supongo que protege la membrana de su carga negativa y permite que ocurra la internalización.

Supongo que la naturaleza anfipática del PEG, al ser parcialmente hidrofóbico, también ayuda a suavizar la membrana. Curiosamente, si aumenta la concentración de PEG más allá de los límites, disminuye la eficiencia del procedimiento.

Supongo que tiene una función análoga en los tampones de ligadura. Allí, aparentemente ocupa una gran proporción del volumen y, por lo tanto, aumenta la posibilidad de interacción entre fragmentos de ADN.

En un tampón de transformación, debería aumentar la posibilidad de que el ADN entre en una célula. Desafortunadamente, la única referencia que encontré para esto fue en Bitesizebio: http://bitesizebio.com/20/5-dna-ligation-tips/