Alineación óptica de un microscopio de barrido confocal

El concepto básico de la alineación óptica es alinear perfectamente el haz paso a paso en todos los elementos ópticos. Asegúrese de que su haz tenga la altura y el ángulo correctos antes de la alineación. Su objetivo es alinear el haz en el eje óptico del microscopio. El uso de fuentes puntuales como (p. ej., perlas fluorescentes, microesferas, puntos cuánticos, pozos cuánticos, centros NV en diamantes) permite una fácil alineación con una función de dispersión puntual en su sensor CCD.

En el eje con una apertura de iris

Un método rápido utiliza una apertura de iris para hacer un haz paralelo al eje óptico . Insertar iris$A$entre M3 y M2. La apertura del iris abierto debe permitir que el haz se transmita en el centro. Coloque un espejo perpendicular al eje opical en la etapa de traducción con el objetivo del microscopio y el ocular. El haz se refleja en el espejo plano y posiblemente incide en la parte posterior de la apertura del iris.

Iterar alineación de ángulo y posición

Usando M3 para centrar el haz en la parte posterior de la apertura del iris, mientras mueve la apertura hacia arriba y hacia abajo. Los posibles errores de posición deben estar alineados con el espejo M1 y M2. Estos tienen el mayor impacto en la posición. Comience a iterar con la alineación del ángulo. Esta alineación gruesa debería permitir insertar elementos de microscopio y alinear finamente el haz con el objetivo del microscopio.

Una versión de baja tecnología de una fuente puntual en el plano del escenario es usar un agujero de alfiler (muy pequeño, dependiendo del aumento de su objetivo, digamos 1um - 10um). Luego ilumine la parte posterior del agujero de alfiler usando un láser. Obtendrá una fuente casi puntual, por supuesto, no es buena para determinar los PSF, pero tal vez sea suficiente para la alineación...