He estado tratando de aprender algunas técnicas básicas de secuenciación de ADN y he estado usando BLAST como referencia. Pensé que estaba empezando a entenderlo, pero luego me encontré con esto:
Parece que dice que el partido comienza en 10835 y termina en un índice más pequeño (10714). Intenté hacer clic en el enlace para ver la secuencia completa y no pude encontrar la parte resaltada en ninguna parte (ni en 10835 ni en 10776).
Mi pregunta es: ¿Dónde (en NR_046235.1 ) puedo encontrar la secuencia resaltada? ¿Y qué significa decir que Sbjct
comienza en 10835 y termina en un índice más bajo?
Puedo publicar mi consulta si es necesario. Gracias.
Tenga en cuenta que la secuencia de consulta que ha proporcionado coincide con el hilo negativo de su secuencia de destino. Eso significa que no solo se invertirá la secuencia objetivo (como ha notado), sino que también se complementará. Entonces, en el registro de GenBank, no debe buscar la secuencia que CCGACCGA...
comienza en la posición 10835, debe buscar la secuencia que ...TCGGTCGG
termina en 10835.
ccgaccga... minus strand
||||||||
bbɔʇbbɔʇ... forward strand
La secuencia en el registro de GenBank contiene espacios, por lo que complica encontrar su secuencia usando la función "Buscar" del navegador, pero si usa los índices de posición al principio y al final de cada línea de secuencia, podrá encontrar el complemento inverso. de la secuencia coincidente informada en los resultados de BLAST.
Solo para desarrollar un poco la respuesta de Daniel Standage, recuerde que un genoma tiene doble cadena y una cadena es complementaria a la otra. Los genes se pueden encontrar en cualquier hebra, los dos son biológicamente equivalentes. Sin embargo, los proyectos de secuenciación eligen uno de los dos hilos (al azar) y lo llaman el hilo más (+) y luego guardan todas las secuencias con respecto a ese hilo. Esto significa que, a veces, la secuencia genómica que descarga de una base de datos puede ser el complemento de la secuencia real que está buscando.
BLAST y algoritmos similares toman esto en cuenta y compararán su secuencia de consulta con ambos hilos. Si su consulta llega a la secuencia de destino en el hilo -, BLAST le dará un resultado como el que ha obtenido, donde el inicio del HSP es más bajo que el final. Esto se debe a que la traducción del ARN (aunque no la transcripción del ADN) va en una dirección de 5' a 3', en ambas cadenas. Por lo tanto, "leemos" los genes en esa dirección. Las coordenadas son siempre con respecto a la hebra + ya que siempre consideramos el ADN en una dirección de 5' a 3', esto significa que su posición inicial parecerá estar después de su posición final. Esto se explica mejor usando una imagen:
En la imagen de arriba, la línea azul representa su hit BLAST. Se extiende desde la posición 10 hasta la posición 40 (con respecto a la hebra +). Sin embargo, dado que está en el hilo negativo, BLAST lo mostrará comenzando en la posición 40 y terminando en la posición 10.
alan boyd
Konrad Rodolfo
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Galeno