¿Cómo mido el crecimiento bacteriano en placas de agar (ya sea por masa celular o por recuento de células)?

Estoy haciendo un experimento en el que cultivo S. mutans en placas de agar y no estoy seguro de cómo mediría el crecimiento de S. mutans . Tampoco estoy seguro de si haría esto midiendo la masa celular o el recuento de células. ¿Algunas ideas?

por favor, especifique con qué comienza exactamente y qué quiere lograr exactamente
@aaaaaa no ha estado aquí por más de 2 años.

Respuestas (2)

La forma más sencilla es sembrar las placas con una suspensión de bacterias asegurándose de distribuir la solución correctamente. Luego puedes contar el número de colonias, que sería igual al número de células individuales.

Si desea medir la velocidad de crecimiento, normalmente es más sencillo medir el diámetro de las colonias, asegurándose siempre de inocular las placas con la misma cantidad de inóculo.

Por último, es aún más fácil estimar el crecimiento si tu cultivo es en un medio líquido y mides la densidad óptica con un espectrofotómetro.

No entiendo el efecto de no "asegurarse siempre de inocular las placas con la misma cantidad de inóculo".
Si inoculas una placa con 100 bacterias/ml y una segunda placa con 1000 bacterias/ml, la segunda tendrá más colonias, aunque el efecto del experimento sea el contrario.
Muchas gracias. Y gracias por aclarar esa afirmación. Estaba a punto de hacer la misma pregunta. Además, entiendo la segunda parte, pero todavía estoy confundido sobre lo que quiere decir con "sembrar las placas con una suspensión de bacterias asegurándose de distribuir la solución correctamente. Luego puede contar el número de colonias, que sería igual a la número de células individuales". Lo siento si esta es una pregunta tonta, es solo que estoy en octavo grado y soy bastante nuevo en esto. Estoy haciendo esto para la feria de ciencias, en realidad.
Imagina que tienes un medio líquido con una concentración de 100 bacterias/ml e inoculas una placa con 1 ml. En teoría, cada célula crecerá para formar una colonia, por lo que debe tener alrededor de 100 colonias. Si no lo distribuye correctamente, las 100 colonias aparecerán agrupadas y no podrá identificar colonias individuales. Es por eso que debes esparcir el inóculo para formar una capa homogénea sobre el agar, normalmente usando un asa de inoculación.
"Entonces puedes contar el número de colonias, que sería igual al número de células individuales". - No lo hará. Será igual al número de UFC, no de células.

Es casi seguro que querrá realizar diluciones en serie de su suspensión y sembrar las diluciones en serie utilizando el método de placa extendida (o método de placa de vertido). Las diluciones harán que sea mucho más fácil contar el número de bacterias .

Generalmente, no se recomienda contar más de 250 colonias en una placa por razones de precisión (pero nunca cuento más de 50, porque esa es la única razón para hacer diluciones en serie). Aquí hay una buena imagen de lo que estoy hablando. Incluye una descripción de cómo calcular el número de organismos en la solución original. Han optado por contar el número de bacterias en la cuarta placa (dilución 1:10.000) para estimar el número de bacterias en el inóculo original. Espero que esto ayude ![ingrese la descripción de la imagen aquí] 1

Por cierto, el medio selectivo prototípico para S. mutans es el agar mitis-salivarius. Debería consultar este documento sobre el cultivo de S. mutans jcm.asm.org/content/4/1/95.full.pdf
Su respuesta me hace feliz, porque proporciona una técnica microbiológica real utilizada en laboratorios. Lo haría aún mejor aclarando la diferencia entre los recuentos de CFU y los recuentos de células. Y sería bueno agregar que el proceso debe replicarse para estimar el error.
Ehhh bien, bueno, CFU significa unidad formadora de colonias. Cada uno de esos puntos en la placa es una colonia, y asumimos que cada colonia es el resultado de una sola célula de la solución original. Entonces, al contar la cantidad de colonias en la placa, también contamos la cantidad de células individuales en la solución original que iniciaron las colonias en la placa, también conocidas como unidades formadoras de colonias (UFC). Y claro, puede hacer esto por duplicado o por triplicado si lo desea e informar el promedio de los conteos, pero se entiende que este método es solo una estimación, así que elija la metodología que mejor se adapte a sus necesidades.
¿Cómo mido el crecimiento bacteriano en placas de agar (ya sea por masa celular o por recuento de células)?
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